王永忠  吴国祥  秦有来  许建兰  陈敏  濮翔科

（常州市第三人民医院，江苏常州 213001）

摘要:

目的 探讨血清乙型肝炎病毒（HBV）基因型及HBV外膜大蛋白（LHBs）水平与肝细胞癌的关系.

方法 对61例肝癌、65例慢性活动性乙型肝炎患者及10例HBV携带者的血清HBV基因型、HBV LHBs进行检测.

结果 136例中,B基因型56例（41.0%）,C基因型76例（55.9%）,B、C混合型1例（0.7%）,B、D混合型3例（2.2%）;随病情加重,C基因型比例增加;不同基因型HBV感染的肝癌患者间HBV DNA、HBV LHBs水平存在明显差异;慢性活动性肝炎患者二者无统计学差异.

结论 本地区HBV以B、C基因型为主,不同基因型HBV感染在肝癌的发生中可能存在不同机制.

关 键 词:肝肿瘤；肝炎病毒，乙型；基因型；外膜大蛋白

C lin ica l significance of HBV ge no types and large envelope prote in quantitative defection in hepatocellular carcinoma

WANG Yong-zhong, WU Guo-xiang, QIN You-lai, XU Jian-lan, CHEN Min, PU Xiang-ke （The Third People＇s Hospital of Changzhou, Changzhou 213001, P. R. China ）

Abstract:[Objective] To explore the relation between HBV genotypes, the level of serum large envelope （LHBs） with hepatocellular carcinoma （HCC）. [Methods] HBV genotypes and HBV LHBs in sixty one HCC patients,sixty five chronic active hepatitis and ten H13V carries were detected,[Results] There were 56 （41.0%） B genotypes and 76（55.9%） C genotypes in 136 cases, only one （0. 7%） patients was found with both B and C, and three patients （2.2%） were found with B and D genotypes HBV in serum, the ratio of genotype C is in- creased with pathogenetic condition aggravation ; The level of HBV DNA and HBV LHBs in different HBV infected gene type of HCC had obvious differences; there was no significant difference in the levels of HBV DNA and HBV LHBs in chronic hepatitis B（P〉0.05）. [Conclusion] These results indicate HBV with genotype B and C exist in our area;and different HBV genotypes could have different roles in the development from hepatitis to HCC.[著者文摘]

Key words: bepatocellular carcinoma; hepatitis B virus genotype; DNA chips; large envelope protein

    乙型肝炎病毒（HBV）感染可导致急、慢性病毒性肝炎，继之发展为肝硬化及肝细胞癌。HBV可分为A至H八个基因型，文献报道，不同年龄段肝癌患者HBV优势基因型不同^[1]。HBV外膜大蛋白（HBV L HBs）是具有双重跨膜拓扑结构的蛋白^[2]，与病毒复制密切相关。过量HBV L HBs在肝细胞内质网积聚是导致内质网应激的关键因素，并与肝细胞毒性甚至肝癌相关。为探讨HBV基因型及HBV L HBs与肝癌的关系，2005年11月至2006年8月，我们对136例肝癌、慢性活动活肝炎、HBV携带者的临床标本进行了检测。

1  资料与方法

1.1 临床资料  61例肝癌、65例慢性活动性肝炎患者血清标本取自本院住院患者血清资料库，10例HBV携带者血清取自本院体检人群。肝癌病例均经临床、B超、病理检查确诊，慢性活动性肝炎和HBV携带者符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的病毒性肝炎防治方案中病毒性肝炎的诊断标准。男110例、女26例，年龄（45.83±13.49）。所有血清标本分离后冻存在 -80℃超低温冰箱。

1.2 方法

1.2.1 HBV基因型检测  采用中国科学院上海微系统与信息技术研究所研制的基因芯片检测试剂盒，将待测不同HBV基因型的特征基因片段（靶基因）固定于玻片上制成检测芯片，将从患者血清中抽提出的HBV DNA经PCR扩增标记后与芯片进行杂交，杂交信号由扫描仪扫描，再经计算机分析确认实验结果，具体操作严格按说明书进行。

1.2.2  HBV LHBs检测 HBV LHBs检测试剂应用结构生物学和免疫学技术，筛选出针对HBV大蛋白前S区立体构象型表位的高特异性、高亲和力的单克隆抗体，并在微孔条上预包被，配以辣根过氧化物酶标记抗体，TMB显色，采用双抗体夹心法检测，由全自动酶联免疫分析仪读取并自动分析结果。 

1.3  统计学方法  采用SPSS 13.0软件进行统计分析，不同基因型间HBV DNA、LHBs含量的比较采用t检验。

2 结果

2.1  HBV基因型检测结果  见表1。随病情加重，B基因型比例逐渐降低，C基因型比例逐渐升高，B、C基因型为本地区优势基因型。