2、结果 (见表1)表1 3种检测结核分枝杆菌方法的阳性率结果（略） 3、讨 论 结核病是一种感染性疾病，病因很明确，实验室诊断是确诊的主要依据。对肺结核诊断最有价值的是细菌学检查，由于菌阴肺结核在肺结核中占相当大的比例，抗酸染色阳性率低，灵敏度和特异性也很差，并受送检标本质量影响较大［3］，结核菌快速培养所需时间较长，阳性率也较低，给肺结核的早期诊断带来困难。本文结果表明，3种方法对558 例痰标本中结核菌的检出率差异有显著性(P＜0.05)，荧光定量PCR技术检测的阳性率为47.8％，明显高于涂片抗酸染色法和快速结核菌自动培养，这与国内文献相关报道基本相同［4］。另外整个荧光定量PCR检测过程包括扩增样本的制备和检测报告的发出，仅需要5～6 h，大大缩短了结核分枝杆菌的检出时间，可以作为肺结核患者早期诊断和鉴别诊断的重要依据，还可以通过相对定量检测体现病原体含量与复制水平、感染程度之间的关系，为评价和考核治疗效果及监测疾病发展和转归提供有效信息，是一种简便、快速、特异的结核分枝杆菌检测方法。3种检测方法的敏感性比较，荧光定量PCR技术也明显高于快速结核菌培养法、涂片抗酸染色法。3种方法阳性报告时间比较，涂片抗酸染色法和荧光定量PCR技术远比快速结核菌培养法要短，而涂片抗酸染色法的阳性检出率很低，对临床早期诊断和治疗帮助有限。 目前，PCR技术已广泛用于感染性疾病、肿瘤、遗传病等疾病诊断及生物工程等各个方面。传统PCR技术在临床应用仍有一定局限性，其原因主要表现在对核酸样本的分离纯化过程中引起的假阴性和由于扩增产物污染和实验操作所致标本污染引起的假阳性两个方面。荧光定量PCR技术克服了传统PCR技术易污染、假阳性率高的缺点，具有操作简单、结果可靠、重复性和特异性好、灵敏度高、可定量等优点。
当然，仅凭1次荧光定量PCR结果就作出诊断是片面的，还应结合临床表现、影像学检查及其他实验室相关检验等综合判断，可疑患者还可以复查或用支气管肺泡灌洗液检测结核分枝杆菌。科学研究已经证明，人类疾病大都直接或间接与基因有关，临床实验医学正在进入基因诊断时代，应用荧光定量PCR技术检测痰中的结核分枝杆菌可作为可疑肺结核患者的首选检查之一，尤其是对因菌量少或细菌发生L型变异而不易分离培养成功的标本更有实用价值，并应成为临床结核分枝杆菌实验诊断的常规技术［5］。 【参考文献】 ［1］中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京：东南大学出版社，2006：791798. ［2］杨顺利，范梦柏，张吉平.结核菌培养方法对照与效果分析［J］.中国药物与临床，2007，7：10. ［3］叶林德.肺结核患者痰液性状对检测结果的影响［J］.浙江预防医学，2002，14(7)：80. ［4］张翊，卢建平，叶淼.四种结核分枝杆菌检测方法的临床应用评价［J］.中国防痨杂志，2006，28(1)：1417. ［5］陈红兵，周志红，贺润年，等.荧光定量PCR技术在结核杆菌检测中的应用［J］.实用医学杂志，2008，24(21)：3 7653 767.
文章来源：中华检验医学网
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