首页 在线EQA 新闻资讯 会议会讯 政策法规 学术交流
在线IQC 下载中心 临床检验参考区间 血铅检测
POCT血糖  检验结果互认  新生儿疾病筛查  实验室管理办法
EQA不及格分析   质量指标   六西格玛   检验科工作的医师
室间质评 新筛采集 检验同质化质控品管理平台
首页 >> 新闻资讯 >> 检验技术
血红蛋白电泳检查(电泳法)
更多相关新闻    时间:2009/1/6 15:07:07,点击:0

1. 原理
     
       血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白,其表面电荷不同,在电场中的泳动率不同。本实验在碱性(PH=8.60)条件下,以琼脂糖凝胶电泳的方法进行,对红细胞洗涤后造成溶血,电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后,肉眼可直接判别有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红蛋白异常有二种类型:血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常,称之为地中海贫血。

2. 标本采集

2.1 标本采集前病人准备:受检者应空腹。
2.2 标本种类:抗凝血
2.3 标本要求:抗凝剂选用EDTA,柠檬酸或肝素均可,避免碘乙酸。常规静脉采血1.8ml,加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。清洁试管中,充分混匀。

3. 标本储存:储存于2-8℃冰箱中,5天。

4. 标本运输:储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。

5. 标本拒收标准:细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。

6. 试剂

6.1 试剂名称:血红蛋白电泳检查试剂
6.2 试剂生产厂家:法国Sebia公司
6.3 包装规格:150tests
6.4 试剂盒组成
琼脂糖凝胶  10块                 溶血素  1瓶
缓冲液条带  10包×2条             薄滤纸  1×10张
氨基黑(浓缩液)1瓶×100ml         点样模具滤纸  10条×1盒
6.5 试剂储存条件及有效期:贮存于室温(15~30℃)或冰箱(2~8℃),不能冷冻。有效期两年。

7. 仪器设备

7.1 仪器名称:SEBIA电泳仪
7.2 仪器厂家:法国Sebia公司
7.3 仪器型号:HYDRASYS

8. 操作步骤

8.1 血红蛋白液制作:抗凝血离心,5000rpm,5分钟,去掉血浆,用10倍体积的生理盐水洗涤红细胞3次,若红细胞体积小于10ul,需特别小心。取10ul红细胞加入130ul溶血液造成溶血。震荡混匀10秒钟,室温下培育5分钟待测。
8.2 启动电泳仪
8.3 将加样器放在一平板上,有数字的一端向上。各加样孔加入10ul溶血的样品,2分钟内加样完毕。将加样器放入保湿盒内,齿端向上(转运时用塑料齿保护架)。等待5分钟,使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖,抬起电极和加样器支架。
8.4 使用HYDRAGEL 15 HEMOGLOBINCE时选择仪器的“HBTOTAL”程序(位于链盘左侧)。
8.5 从包装袋内取出缓冲条,拿出末端的塑料片,将缓冲条两端塑料片固定在电极支架背侧的钉上,塑料片应紧贴支架。
8.6 取出凝胶板。将薄的滤纸轻轻吸去凝胶板表面的多余液体,然后立即丢弃滤纸。在电泳仪温度控制板表面的边线内加200ul蒸馏水或去离子水。凝胶面朝上,放置凝胶板,边缘对齐边线。略略将凝胶弯曲,然后放平,使水均匀分布在凝胶板下面而不含气泡。
8.7 降低支架,使缓冲条不接触到凝胶板。
8.8 从保温盒里取出加样器。取时拿保护框。折断加样器齿端保护框。将加样器放在4号位置。
8.9 关上电泳仪盖子,按下键盘左侧的绿色箭头“START”键,电泳开始。
8.10 凝胶染色扫描
8.10.1 打开盖子
8.10.2 取出并丢弃加样器
8.10.3 升高两个支架,握住塑料端取出并丢弃缓冲条。
8.10.4 打开凝胶托架,平放,将干燥的凝胶片放入两层间,然后关上托架。
8.10.5 将凝胶支架放入染色池
8.10.6 取出凝胶支架,打开盖子,取出干燥的凝胶片。
8.10.7 在光密度仪的570nm处或以黄色滤光片扫描测定。使用HYDRYS,DVSE或PREFERENCE光密度仪时,使A2片段的标记置于扫描板5mm的标志处。

第1页 第2页
打印】【关闭
 
更多相关的信息
三种梅毒检测方法的评价2008-11-28
乳酸的测定方法2008-8-27
ABO血型鉴定和交叉配血实验2008-9-9
唐氏综合征和神经管缺陷的产前筛查方法2009-3-25
游离雌三醇检测参考值及临床意义2008-12-5
血红蛋白电泳检查(电泳法)2009-1-6
凝血试验PT-INR的计算方法2008-10-30
卵巢癌早期诊断有特异指标2006-3-9
 
类别
今日要闻 综合新闻
公司动态 检验技术
医检交流 仪器试剂
继续教育 其他
热门新闻
    ·2011年检验人员招聘信息(11月25日更新!)
    ·2009年卫生专业技术资格考试辅导(更新)
    ·检验技术资格考试考点精要(全集)
    ·临床医学检验技师职称资格考试真题(一)
    ·检验专业技术资格考试常考知识点(难点归纳..
    ·检验技术资格考试考点精要——血液学检验
    ·2012年人员招聘信息
    ·检验士资格考试 专项练习(套题 附答案)
最新新闻
    ·百年老院换新颜打造齐鲁新高度
    ·让百姓在家门口享受一流检验医学服务
    ·罗湖医院集团突破创新 引领实验室发展新变..
    ·打造鲁中医疗高地,百姓家门口享受国内一流..
    ·InterSystems助力澳大利亚多家医学检验检测..
    ·尿液检测自动化提升 让诊断更可靠、患者更..
    ·深化医联体服务改革 患者就医更快更好
    ·佛山启动首个临床检验结果互认技术平台
最新产品发布
 ·临床检验质量指标—危急值和周转时间
 ·临床检验质量指标
 ·临床检验风险管理
 ·临床检验质量控制技术(第3版)
 ·临床微生物学检验
 ·CLInet-EQA系统
 ·临床检验6σ质量设计与控制
 ·临床检验生物学变异与参考区间
产品关注排行
 ·实验室内质量控制管理系统(单机版)
 ·临床检验质量控制技术(第2版)
 ·《临床检验方法确认与性能验证》(王治国 ..
 ·临床检验质量控制技术(第3版)
 ·临床检验质量控制技术
 ·临床检验6σ质量设计与控制
 ·全自动生化分析仪
 ·临床检验质量指标—危急值和周转时间
clinet简介 | 服务指南 | 广告服务 | 联系我们 | 产品答疑 | 给学术交流投稿 | 客户投诉
国家药监局(京)-非经营性-2006-0012
京ICP备19043313号
Copyright 2008 @Clinet.com.cn 版权所有